BATTERI ENTEROBATTERI

La famiglia Enterobacteriaceae comprende batteri che hanno l'intestino come l'habitat generale. Ma non tutti gli entero vivono nell'intestino.

Questi batteri sono a bastoncino. gram - , Asporigeni e peritrichi, cioè hanno 5 flagelli.

Sono Aerobi Facoltativi, catalasi +, ossidasi -, Fermentano zuccheri diversi fra diversi ceppi enterobatterici.

I principali Generi degli Enterobatteri sono:

• Escherichia Coli,Commensali Nell' Intestino


• Coliformi; citrobacter, enterobacter, klebsiella


• Salmonella; uno dei più pericolosi


• Shigella; uno dei più pericolosi


• Proteus;uno dei più Pericolosi


• Yersinia

CLASSIFICAZIONE

1°Classificazione, Si basa sul riconoscimento di Antigeni di superficie utilizzando anticorpi specifici. Gli antigeni Di Superficie sono sul flagella (Antigene H), Sulla parete (Antigene O) e sulla capsula (Antigene K)

2°Classificazione, Si basa su diverse Prove colturali e sulla fermentazione Dello Zucchero Lattosio

A1.) Crescita su Agar Mc Conkey

-è un terreno selettivo e differenziale, utilizzato per l'isolamento e identificazione presuntiva di un enterobatterio.

-Contiene come agente Selettivo il sale biliare, e Come agente differenziale il lattosio.

Lattosio - : colonie piccole e biancastre con spumatura rosa

Lattosio + con scarsa acidità: Colonie rosa

Lattosio + con Alta Acidità: Colonie Rosse intense

A2.)Crescita su Agar Eosina Blu di Metilene

-è un terreno selettivo, per l'eosina, e differenziale per il lattosio.

Lattosio - : Colonie piccole ed incolori

Lattosio + con Scarsa acidità: Colonie grigie o brune in luce attraversata

Lattosio + con Forte acidità: Colonie Verdi metallici

A3.)Crescita Su Agar Hektoen Enteric

-Terreno x l'isolamento di shigella e salmonella.

-Distinguono le shigelle e salmonelle da coliformi e Escherichia coli

Shigelle e Salmonelle: colonie verde con centro nero

Coliformi: Colonie Giallastre

B1.)Crescita su Brodo Lattosato

-è un test che permette di riconoscere gli e.Coli e gli altri Coliformi(Lattosio + con produzione di gas) distinguendo dagli altri batteri.

-è differenziale x l'uso di campanella di Duruahm, questa campanella raccoglie Gas prodotto dalla fermentazione del lattosio.

B2) Crescita su Agar S.S

-S.S sta per Shigella e salmonella

-Distingue le shigelle e salmonelle

da Altri batteri enterobatteri

Shigelle: Colonie piccole incolori e opache

Salmonelle: colonie trasparenti con centro nero

i coliformi e gli altri enterobatteri non crescono x la riduzione del solfato a solfuro

B3.) Crescita Su Agar Citrato

-permette di riconoscere gli entero batteri che si accontentano dello ione citrato come unica fonte di carbonio.

-Distingue gli enterobacter (Lattosio +) da E.Coli .

-Contiene sostanze tutte inorganiche tranne il Citrato e l'indicatore blu di bromotimolo che diventa blu a pH Basico.

-Si semina per infissione e striscio semplice

-Si incuba x 24 ore a 37°C

-Se il terreno diventa blu, il test è positivo, il batterio è cresciuto e ha prodotto sostanze alcaline.

C.) Enterotube: è un materiale che permette di seminare lo stesso batterio su diversi terreni di coltura contemporaneamente, riducendo così il tempo di semina, i materiali da usare efacendo più preciso l'identificazione dell' enterobatterio..

BATTERI STEPTOCOCCHI

Sono Batteri appartenenti alla famiglia streptococcaceae e il genere principale è streptococcus, un genere molto ampio che comprende molte specie che si assomigliano tra loro per molte caratteristiche metaboliche e morfologiche ma sono molto diverse per l'habitat e per il rapporto con l'uomo.

Gli streptococchi sono batteri responsabili a diverse patologie come polmoniti, bronchiti, scalattina, carie, setticemie, infezioni urinarie ecc.ecc.ecc.

Tutti gli streptococchi sono gram +, cocchi o ovali disposte a catenelle, asporigeni, e non hanno il flagella. Sono ossidasi e catalasi - , tollerano poco l'Ossigeno.Fermentano lo zucchero e sull'agar formano colonie piccolissime.

CLASSIFICAZIONE

1° Classificazione: si basa sull'attività emolitica del batterio ,ossia la capacità di danneggiare i globuli rossi.
Alfa Emolitica: quando i batteri non rompono i globuli rossi ma trasformano l'emoglobina in un composto di color verdastro.

Beta Emolitica: Quando i batteri rompono sia i globuli rossi sia l'emoglobina

Gamma Emolitica: Quando non modificano nessun dei due.

*Lo streptococco più pericoloso è lo streptococco Piogenes perchè beta-emolitico.*



2°Classificazione: La classificazione di Lancefield, Si basa sul riconoscimento di un particolare Antigene polisaccaridico detto Antigene C presente sulla parete dello strepto.La presenza di questo antigene indica la pericolosità. Gli streptococchi più patogeni vengono raggruppati in gruppo A di Lancefield, I secondi più pericolosi in gruppo B di Lancefield e cosi via.

3°Classificazione: La classificazione di Sherman, Unisce tutti i dati relativi alle classificazioni menzionati sopra.

VIRIDANTI: Alfa Emolitici, spesso privi di antigene, commensali in bocca.. I viridanti patogeni sono Gli streptococchi Mutans, responsabili alle carie.

PIOGENI: Beta emolitici, Gruppo A di Lancefield, Tutti Patogeni- S.Pyogenes.

FECALI: Alfa, Beta, Gamma Emolitic, Gruppo D di Lancefield, patogeni opportunisti all'intestino

LATTICI: gamma emolitici, gruppo N di Lancefield, spesso utilizzati nell'industria alimentare

*PNEUMONIAE: Causa polmonite, Alfa emolitico.





Esperienze Pratiche


ATTIVITA' EMOLITICA:

Si fa Crescere il batterio su un terreno chiamato, AGAR SANGUE AZIDE, Agar nutriente con l'aggiunta di Sangue di Pecora,
si fa incubare x 24 ore a 37°C e si osserva,

*Il Batterio X che ho Seminato è un batterio Patogeno perchè all'intorno delle colonie vi è un doppio alone, che indica che i batteri hanno danneggiato i globuli rossi.

IDENTIFICAZIONE DEL BATTERIO ESAMINATO,



dopo aver scoperto Che sono Beta emolitici, Abbiamo seminato lo stesso batterio in un altro terreno Agar Sangue Azide a Striplosemplice , Abbiamo somesso dei dischi di carta contenenti sostanze antibiotiche che si chiamano optochina e bacitrocina.



Come vedete il batterio non è sensibile alla bacitrocina( il disco sopra) ma è sensibile all' Optochina (il disco sotto) quindi possiamo intuire che il batterio sia un Fecalys.

BATTERI STAFILOCOCCHI

Ciao a Tutti.Argomento: Satafilococco Aureus I batteri Stafilococchi appartengono alla famiglia MICROCOCCACEA e al Genere STAPHYLOCOCCUS.
Sono Batteri commensali e Patogeni opportunisti.


Sono i Batteri responsabili alle patologie chiamate:



INTOSSICAZIONE, malattia provocata dall'ingestione di un alimento contaminato da batteri




INFEZIONE, malattia provocata dalla moltiplicazione di batteri all' interno dell'ospite.


Gli stafilococchi più pericolosi sono gli stafilococchi Aureus,.







L'immagine che vedete alla destra è un'immagine di una patologia sul braccio causato da batteri stafilococchi Aureus.






Parliamo adesso di Esperienze Pratiche fatte da noi in laboratorio,, e parliamo di Ricerca degli Stafilococchi Aureus.


Se vogliamo Sapere se a un Campione X sono presenti stafilococchi aureus, dobbiamo iniziare con la fase di ARRICCHIMENTO., questa Fase della ricerca è una fase in cui vengono utilizzati dei terreni di coltura di arricchimento ossiano i terreni che contengono sostanze che favoriscono la crescita di tutti i ceppi batterici che vogliamo esaminare e rallentare la crescita di tutti i batteri che non ci interessano, e in questa fase viene utilizzato il terreno BRODO Giolitti-Cantoni.





Proseguiamo la ricerca con la fase 2, Cioè la fase dell'ISOLAMENTO.In questa fase vengono utilizzati due terreni diversi che si chiamano Agar Sale-Mannitolo e Agar Baird Parker. Questi terreni contengono sostanze che "Selezionano" i batteri che devono crescere e mostrano le differenze sia metaboliche sia morfologiche dei batteri.. La MSA (Mannitol-Salt-Agar) contiene come agente selettivo il Sale NaCl ad Alta concentrazione, Rosso Fenolo come indicatore di pH e Mannitolo e Peptone come Agenti differenziali.



La ABP invece contiene il piruvato di Sodio come agente selettivo, la glicina, LiCl (litio cloruro) e Tellurito di K come agenti selettivi e tuorlo di uovo come agente differenziale.


Procedimento: MSA


-Si semina un batterio a Triplo striscio sul terreno
-incubare x 24 ore a 37 °c
-e osservare

*Gli Stafilococchi Aureus fermentano il mannitolo e produce acidi, quindi l'indicatore rosso fenolo vira al giallo intenso.



*Gli altri Stafilococchi non fermentano il mannitolo e quindi utilizzano il peptone da cui si liberano ioni NH4+ (Ione ammonio) che alza pH quindi il colore vira a Fucsia.










Procedimento: ABP


-versare un supplemento di tuorlo d'uovo e tellurito di potassio nella piastra
-e aggiungere l' Agar Base

-seminare a triplostriscio
-incubare x 24ore a 36 °c e osservare







*Tutti gli stafilococchi riducono il tellurito di K


e formano colonie nere


*Gli stafilococchi aureus producono enzimi (proteasi e glipisi) che demoliscono le proteine e i grassi dell'uovo quindi intorno alle colonie si osserva un doppio alone di chiarificazione.











Fase 3. E' la fase chiamata Conferma, cioè viene confermato se è uno stafilococco o no,utilizzando il metodo di Colorazione di gram. Se è Cocco Gram+ , avete davanti a voi uno stafilococco, e viene eseguito anche in questa fase la ricerca di Catalasi.Gli stafilococchi sono catalasi +.






Questa è un'immagine degli stafilococchi vista da un microscopio con l'obbiettivo 100x immersione.

*a proposito, il colorazione di gram è una colorazione per cellule che hanno caratteristiche e morfologie simili ma hanno un metabolismo diverso.
gram + quando il batterio è colorato di Blu
gram - quando il batterio è colorato di rosa.

è una colorazione che consiste nel colorare il parete delle cellule.:D






Ricerca della Catalasi: è un test che consiste nel ricercare l'enzima che demolisce l'acqua ossigenata in acqua. Questo test consiste nel immergere un'ansata di batteri in una goccia di H2O2 ossia l'acqua ossigenata. La comparsa di bollicine indica la positività.







Fase 4. L'identificazione Presuntiva.In questa fase viene indicata a quale specie appartiene il batterio in esame.Si eseguono le prove seguenti:

-Ricerca Coagulasi: si uniscono in una provetta 0,5 mL di brodo coltura con batteri e 0,5mL di plasma di coniglio.è positivo se si forma un coagulo. (S.Aureus = Coagulasi +)

-Ricerca DNAsi: test di ricerca di enzima che demolisce DNA ossia l'acido deossiribonucleico.
Questo test consiste nell' aggiungere un Acido Forte come HCl ossia Acido Cloridrico in un ceppo batterico. Se intorno alle colonie si presenta un doppio alone, vuol dire che il DNA è stato demolito quindi test +. (S.Aureus= DNAsi +)

-Ricerca Termonucleasi:Test di ricerca di un Enzima termoresistente prodotto dallo stafilococco aureus. Quest'enzima idrolizza il DNA e alla sua produzione è associata la produzione di Enterotossine, Tossine che causano intossicazione.
In questo test, viene riscaldato il campione, lo si depone sull'agar contenente Na e un'indicatore di pH. Dopo l'incubazione, Se c'è il viragio di colore il test è +.



->spero che vi sia piaciuta questa piccola Introduzione sulla Ricerca Degli Stafilococchi

My "Self-Introduction"

Howdy Everybody. Well, I'm Jay, a seventeen-year-old student of Biochemistry in Milan Italy.

I'm a Third-Year student of Ferraris-Pacinotti Istituto Professionale di Stato per l'artigianato e per l'industria, a professional institute located near porta Romana's Metropolitan train station (I don't intend to tell you that it's located along Via Giulio Romano orelse I will be a lil bit too Vulgar if i did.). :D.oOopps..

ah yeah,I was about to forget to tell you, I'm a filipino Immigrant in Italy.I'm Here for about 4 years.Yeah Yeah. I find myself better here than in the Philippines..However, i like philippines,too..I like the schools...I mean their (our) way of instructions, The only negative point there is,,aside from the favoritism of the students,, there is a lackness of materials. Well, Studying in the philippines is a real fun!.There is a lot of activities, If i were to nominate them all maybe there is no "characters" enough..wahaha!!..kidding..;D

I love italy,,you learn well with the usage of the "scholastic materials"..the best advantage of studying here!!!...

I know you don't Care about my hobbies and interests but i'll tell you still, bleah... I like going swimming in summer (ofcourse,I'm not that insane to go swimming in winter...aha..may be i could try to do so..what do you think?..). I like surfing on the internet!,..Yahoooooo!!.. I love it..!.. thanks to God and thanks to bill gates!.I like texting and chatting with friends.. I like Dancing!..Oh yeah,, okok..and singing and acting.,,ehem...ehem.. i told you " I like" but i'm not that Good..But i believe in this: "If there's a will there's a way",, No connection?..aye..It's fine,,I just wanted to tell ye..wahahah...

okok..DONE